诊断喉癌时需要与下列疾病相鉴别：
(1)喉结核：早期喉癌须和喉结核相鉴别，喉癌多发于声带前2/3，几乎无原发于杓状软骨间切迹者。喉结核病变多位于喉的后部，表现为喉黏膜苍白、水肿，伴多个表浅溃疡，如虫蚀状；也可出现一侧声带充血和增厚，但会厌、杓会厌襞都有较广泛的水肿和表浅的溃疡。喉结核的主要症状为声嘶和喉痛。肺部X线片，痰的结核杆菌检查有助于鉴别诊断，但最终仍依赖于活检。
(2)喉乳头状瘤：喉乳头状瘤可单发或多发，其外表粗糙、呈淡红色，无声带运动障碍，而喉癌多为单发，肉眼极难鉴别。特别是成人的喉乳头状瘤易恶变，更须活检鉴别。
(3)喉淀粉样瘤：并非真性肿瘤，可能是由于慢性炎症、血液和淋巴循环障碍、新陈代谢紊乱而引起的喉组织的淀粉样变。表现为声带、喉室或声门下区的暗红色肿块，表面光滑，活检时觉其质地较硬，不易钳取，病理检查易于鉴别。
(4)喉梅毒：病变多位于喉的前部，黏膜红肿，常有梅毒瘤，继而出现较深的溃疡，破坏组织较多，愈合后有瘢痕收缩粘连，造成喉畸形。患者声嘶但有力，喉痛较轻。有性病史，康-华反应阳性，活检可得证实。喉返神经麻痹，环杓关节炎也可误诊为喉癌。反之，喉癌也常被误认为喉返神经麻痹或环杓关节炎，应注意加以鉴别。喉癌还应与喉角化症、喉黏膜白斑病、呼吸道硬结病、气管内或喉内异位甲状腺、喉气鼗肿及喉软骨瘤相鉴别。
